Zásady lyofilizačních kultur (lyofilizace)
Lyofilizace, známá také jako lyofilizace, je proces používaný k ochraně biologického materiálu odstraněním vody ze vzorku, který zahrnuje první zmrazení vzorku a jeho sušení za vakua při velmi nízkých teplotách. Lyofilizované vzorky mohou být skladovány mnohem déle než neošetřené vzorky.
Proč se používá lyofilizace
Lyofilizací nebo lyofilizací bakteriálních kultur stabilizují kultury pro dlouhodobé skladování, přičemž se minimalizuje poškození, které může být způsobeno striktním sušením vzorku.
Mnoho mikroorganismů přežívá dobře, když je lyofilizováno a může být po delší době skladování snadno rehydratováno a kultivováno v kultivačním médiu.
Lyofilizace se také používá v biotechnologickém a biomedicínském průmyslu k ochraně vakcín, krevních vzorků, purifikovaných proteinů a dalších biologických materiálů.
Tento krátký laboratorní postup lze použít s jakýmkoli běžně dostupným lyofilizátorem, aby se zachovala vaše kultura.
Proces lyofilizace
Proces lyofilizace je ve skutečnosti aplikací fyzického jevu nazývaného sublimace: přechod látky z pevného do plynného stavu, aniž by nejprve prošel kapalnou fází. Během lyofilizace se voda ve zmrazeném vzorku odstraní jako vodní pára, aniž by se nejprve rozmrazil vzorek.
Obyčejné chyby
Jedna z nejběžnějších chyb, pokud jde o lyofilizaci, není znát bod tání vašeho vzorku, což ztěžuje výběr správného lyofilizéru.
Vaše vzorky se během procesu mohou roztavit. Další častou chybou je, že chladnější je při lyofilizaci na lyžárně typu lyofilizéru lepší. Během primárního sušení byste měli teplotu skladu nastavit těsně pod eutektickou teplotu vzorku. Mělo by existovat jen dost tepla, aby se molekuly vzorku povzbuzovaly k pohybu, ale zabránilo tání.
Třetí chybou je použití nesprávného vybavení pro vaše vzorky. Protože lyofilizátory se používají ve skupinovém nastavení, měli byste před nákupem vědět následující:
- Kolik vlhkosti bude lyofilizováno
- Co je vzorek (a eutektická teplota)
- Jak správně používat lyofilizátor
Pokud se zařízení nepoužívá správně, mohlo by dojít ke zničení všech vzorků. To nás přivádí k další běžné chybě: Neudržuje vakuové čerpadlo. Čerpadlo musí být ve vynikajícím provozním stavu, aby fungovala lyofilizace. Během provozu čerpadla s otevřeným plynovým předřadníkem 30 minut před a po procesu suchého mrazu se prodlužuje životnost čerpadla. Otevření plynového předřadníku odstraňuje nečistoty z čerpadla, aby nedošlo k poškození vnitřních součástí. Měli byste často zkontrolovat, zda olejový olej čerpadla nezpůsobuje změnu barvy a částice, a podle potřeby vyměňte olej. Pravidelné změny oleje udržují čerpadlo při optimálním vakuu v průběhu suchého vymrazování.
Konečně, může mít špatné lyofilizační příslušenství pro váš lyofilizační proces také velkou chybu. Potřebujete vzorku zátky pod vákuem? Poté je zapotřebí zastavovací komora. Zahájíte lyofilizaci v baňkách? Pak se ujistěte, že máte sušicí komoru s porty.
Tím, že se vyvarujete výše zmíněných chyb, můžete poskytnout lepší péči o vaši lyofilizátor a čerpadlo a při vysušení mrazem máte lepší vzorky.
Reference
Labconco News. "Top 5 chyb při lyofilizaci." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes